乳(rǔ)鐵蛋白(Lactoferrin, Lf)是(shì)一種(zhǒng)主要(yào)存在於(yú)哺(bǔ)乳(rǔ)動物(wù)乳汁(zhī)中(zhōng)的(dí)糖(táng)蛋(dàn)白,相對分(fēn)子(zǐ)量約為80KDa,乳鐵蛋白在(zài)體(tǐ)內不僅(jǐn)參與鐵的轉(zhuǎn)運,還(huán)具有抗(kàng)菌,抗病毒,抗(kàng)氧(yǎng)化和(hé)免(miǎn)疫(yì)調節的(dí)功能。被認(rèn)為(wéi)是一(yī)種新型(xíng)的抗菌(jūn),抗癌(ái)藥(yào)物(wù)和具有開(kāi)發潛(qián)力的(dí)食(shí)品(pǐn)和飼(sì)料(liào)添加(jiā)劑(jì)。目(mù)前已(yǐ)被(bèi)廣泛(fàn)添加(jiā)於(yú)嬰幼(yòu)兒(ér)食品中。
肝(gān)素親和柱可特(tè)異(yì)吸(xī)附乳(rǔ)鐵(tiě)蛋白,試樣(yàng)中(zhōng)鐵蛋白經緩(huǎn)衝(chōng)液提取,用肝(gān)素親(qīn)和柱淨(jìng)化後的(dí)樣品(pǐn)液(yè)可(kě)直接用於HPLC分(fēn)析。
肝素親和柱與(yǔ)HPLC配(pèi)合(hé)使用(yòng)可(kě)達到(dào)快速測(cè)定(dìng)的目的,以(yǐ)改(gǎi)善(shàn)信噪比,可(kě)提(tí)高(gāo)檢(jiǎn)測方法的準確(què)度(dù)。
肝素免(miǎn)疫(yì)親和(hé)柱(zhù)能夠特異(yì)性的(dí)純化樣品中(zhōng)的乳鐵蛋白(bái),樣品前處理(lǐ)後,通(tōng)過免(miǎn)疫(yì)親(qīn)和柱淨化,乳(rǔ)鐵(tiě)蛋白特異性(xìng)吸(xī)附在親和(hé)柱(zhù)上(shàng),用(yòng)淋洗(xǐ)液(yè)將免疫親合柱(zhù)上(shàng)的雜質(zhì)除(chú)去,用洗脫(tuō)液通過(guò)分(fēn)離(lí)柱(zhù),將乳鐵蛋白(bái)親和柱上(shàng)分(fēn)離(lí)下(xià)來,最後(hòu),將洗脫(tuō)液(yè)注入(rù)HPLC或LC-MS進行測定。
1,使用前,親(qīn)和(hé)柱需(xū)回至(zhì)室(shì)溫(18~25℃)。
2,親和柱(zhù)2~8℃儲(chǔ)存,不(bù)得凍存(cún)。冰(bīng)箱內(nèi)建(jiàn)議不(bù)要貼壁(bì)放置,產(chǎn)品易凍(dòng),影響性(xìng)能(néng)!
3,請在有(yǒu)效(xiào)日期內(nèi)使用(yòng)親(qīn)和(hé)柱。
4,取(qǔ)樣量:根(gēn)據需要可(kě)以適當增(zēng)加(jiā)或減少(shǎo)取(qǔ)樣量,注(zhù)意(yì)提(tí)取(qǔ)液(yè)量要相應(yīng)改(gǎi)變(biàn)。
5,柱(zhù)容量(liáng):12ml,檢(jiǎn)測(cè)限5mg,當樣(yàng)本中待檢乳鐵蛋(dàn)白的含(hán)量(liáng)除(chú)以稀釋倍(bèi)數高於柱(zhù)容量(liáng)時,需(xū)要適當降(jiàng)低上樣液(yè)的體積。
6,樣品的淨(jìng)化(huà)過(guò)程中勿將親和柱(zhù)內的液體抽幹,避免氣(qì)體進入(rù)到親(qīn)和柱的(dí)填(tián)料中(zhōng)。
7,三氟乙酸(suān)揮發性,腐蝕(shí)性較強,使(shǐ)用(yòng)過(guò)程中注(zhù)意防護。
| 使用溫(wēn)度 | 使(shǐ)用(yòng)前,親和(hé)柱需回至室溫(18~25℃) |
| 貯(zhù)藏條(tiáo)件 | 2~8℃儲(chǔ)存(cún),不(bù)得凍(dòng)存 |
| 檢測限 | 5mg |
| 有效(xiào)期 | 18個月 |
| 再生 | 洗脫(tuō)完(wán)畢至(zhì)再(zài)生,期(qī)間應(yīng)放置入2-8℃環境中(zhōng),時(shí)間不(bù)超(chāo)過30分鐘 |
| 柱(zhù)容量(liáng) | 12ml |