【一(yī)，食(shí)品安全(quán)與衛生監(jiān)控行(háng)業實驗檢測背景(jǐng)與需求】

跟著食(shí)品安全(quán)國家(jiā)標(biāo)準GB 14934 - 2016《食品安(ān)全(quán)國家標(biāo)準(zhǔn) 消毒(dú)餐(cān)（飲）具》, 還有GB 4789係列(liè)《食(shí)品安全國(guó)家標準(zhǔn) 食品(pǐn)微(wēi)生物學(xué)檢驗(yàn)》的深度施行(háng), 食品(pǐn)加(jiā)工企業, 餐飲(yǐn)服務單位, 以(yǐ)及市(shì)場(cháng)監管部門(mén), 對生產(chǎn)環(huán)境跟(gēn)終(zhōng)產(chǎn)品的微(wēi)生物汙染控製要求越(yuè)發(fā)嚴格。傳統的菌落總(zǒng)數(shù)檢測方法(fǎ), 像平板菌落計(jì)數法, 其結果(guǒ)確實準確(què), 然而(ér)耗時(shí)比較長, 一般的時長是在18至(zhì)24小時之間, 並(bìng)且操作(zuò)繁雜(zá), 這(zhè)樣就(jiù)很難(nán)去滿足現場(cháng)快(kuài)速篩查(chá)以及(jí)實(shí)時衛生(shēng)管理的需(xū)求(qiú)了。

當前(qián)時(shí)候(hòu), 行(háng)業(yè)所麵(miàn)臨(lín)著(zhuó)的(dí)主要挑(tiāo)戰(zhàn)這(zhè)其中包含(hán)了: 怎(zěn)樣去快速(sù)地評(píng)估(gū)餐(cān)具, 操作(zuò)台麵(miàn), 生產設(shè)備表麵以及(jí)半成品(pǐn), 成品的微(wēi)生物汙染水(shuǐ)平(píng), 怎樣在采購(gòu)驗收或者生(shēng)產過程(chéng)巡檢當中(zhōng)即(jí)時(shí)地發現(xiàn)衛生隱患, 這就(jiù)催生(shēng)了(liǎo)對(duì)於能夠“現場(cháng)，快速，定(dìng)量”出(chū)具結果(guǒ)的菌落總數快(kuài)速檢(jiǎn)測儀(yí)器(qì)的迫切需(xū)求, 基於(yú)ATP生物(wù)熒(yíng)光法(fǎ)的(dí)檢測技(jì)術因(yīn)為其十幾(jī)秒(miǎo)就(jiù)可(kě)以出(chū)結果(guǒ), 操(cāo)作(zuò)簡(jiǎn)便(biàn)的特點, 成為了(liǎo)解決上(shàng)述痛(tòng)點的(dí)有(yǒu)效(xiào)方(fāng)案。

【二，實(shí)驗所需儀器(qì)與(yǔ)試(shì)劑(jì)】

核心儀(yí)器(qì): 萊(lái)恩德ATP熒(yíng)光檢測儀, 型號(hào)既有(yǒu)LD - ATP,又有(yǒu)LD - ATP+。

這次實驗方案(àn)所(suǒ)推(tuī)薦(jiàn)使(shǐ)用的是(shì)萊(lái)恩德(dé) LD - ATP 型或(huò)者 LD - ATP + 型(xíng)的 ATP 熒光檢(jiǎn)測儀(yí), 該儀(yí)器是(shì)依(yī)據(jù)螢火蟲(chóng)發(fā)光原(yuán)理的, 它(tā)借助(zhù)檢(jiǎn)測(cè)樣(yàng)品(pǐn)裏(lǐ)的三(sān)磷(lín)酸腺(xiàn)苷也就(jiù)是(shì) ATP 的含(hán)量, 進而間接地(dì)去反映(yìng)微(wēi)生(shēng)物以及(jí)其他生(shēng)物(wù)的殘(cán)留(liú)量, 它的檢(jiǎn)測結(jié)果跟前述菌(jūn)落(là)總(zǒng)數是高(gāo)度相關(guān)的。

采用3.5英寸(cùn)高精度(dù)圖(tú)形(xíng)觸(chù)摸(mō)屏(píng)的(dí)LD - ATP型, 搭載(zǎi)32位高速數據處(chǔ)理(lǐ)芯(xīn)片(piàn), 其檢測(cè)精(jīng)度能夠達(dá)到1×10⁻¹⁸ mol, 檢(jiǎn)測範圍覆(fù)蓋0 - 999999 RLUs, 在15秒內(nèi)就(jiù)可以完(wán)成(chéng)單個樣本的(dí)測(cè)定。該(gāi)儀(yí)器(qì)內(nèi)置(zhì)自校光源, 開(kāi)機30秒(miǎo)就(jiù)能自(zì)動完成(chéng)自(zì)檢, 並(bìng)且支持(chí)通過miniUSB接(jiē)口(kǒu)把(bǎ)數(shù)據(jù)上傳(chuán)至(zhì)PC。LD - ATP + 型在原基(jī)礎之(zhī)上實現(xiàn)了升級, 升級(jí)為(wéi)安卓智能操作(zuò)係統, 配備(bèi)了(liǎo) 4 核 1.88Ghz 的(dí)高速(sù)芯片(piàn), 具備(bèi)多種數據傳(chuán)輸方式, 其中包括(kuò) wifi，藍牙(yá)以及數(shù)據綫(xiàn), 它(tā)還支持(chí)把歷史(shǐ)數據(jù)上傳至在(zài)綫監管平台去(qù)進行(háng)趨勢分析(xī), 這(zhè)極大地(dì)方便了(liǎo)批(pī)量數據的追(zhuī)蹤與(yǔ)管(guǎn)理(lǐ)。

配(pèi)套試劑(jì)與(yǔ)耗(hào)材

用(yòng)作萊恩(ēn)德ATP熒光檢測儀配套的一(yī)體(tǐ)化采集(jí)拭子, 其含有裂(liè)解細(xì)胞膜試劑(jì)以(yǐ)及穩定的(dí)液(yè)體熒(yíng)光素酶, 是實驗的那(nà)種(zhǒng)核心耗(hào)材。此拭(shì)子(zǐ)運(yùn)用(yòng)潤(rùn)濕設計(jì), 能(néng)夠(gòu)有效(xiào)采(cǎi)集(jí)固(gù)體表麵的微生物(wù)樣(yàng)本。另外, 用戶(hù)要依據實(shí)際檢測場景, 準備無(wú)菌采樣袋，無(wú)菌(jūn)手套(tào)，還有(yǒu)用於擦(cā)拭儀器(qì)表麵(miàn)的酒精(jīng)棉(mián)片等常(cháng)規耗材。要是進(jìn)行(háng)如水(shuǐ)質(zhì)，食品原液(yè)這(zhè)類液體(tǐ)樣(yàng)本(běn)的檢(jiǎn)測, 還得準備(bèi)對應的無菌采樣(yàng)瓶以及稀(xī)釋(shì)液。

【三(sān)，標準實(shí)驗操(cāo)作(zuò)方法】

樣品(pǐn)前處(chǔ)理

鑒(jiàn)於待(dài)測(cè)對(duì)象存在不同, 前處理方式呈(chéng)現(xiàn)出差異(yì)跡(jì)象。麵(miàn)對固體(tǐ)表(biǎo)麵領(lǐng)域（打個比方(fāng), 就像(xiàng)餐具，操(cāo)作(zuò)台麵這類(lèi)）, 運用萊恩德一(yī)體化(huà)采集拭(shì)子, 按照標準(zhǔn)化的(dí)S型(xíng)或者Z型路(lù)徑(jìng), 於指定麵積(jī)範圍（一般是10cm×10cm區域）內確(què)保(bǎo)均匀(yún)塗抹來(lái)實施(shī)采(cǎi)樣行為, 以(yǐ)此(cǐ)保證拭子頭能夠充(chōng)分與(yǔ)表麵進行接觸。當(dāng)采樣操(cāo)作(zuò)完成之後, 馬(mǎ)上(shàng)把(bǎ)拭(shì)子(zǐ)插(chā)入(rù)套(tào)管當(dāng)中, 使(shǐ)勁(jìn)用(yòng)力去(qù)折斷拭(shì)子(zǐ)杆(gān)上標(biāo)有(yǒu)標(biāo)記(jì)的(dí)那個關鍵(jiàn)點(diǎn)部位, 進(jìn)而讓拭子(zǐ)頭(tóu)浸入到套管(guǎn)底部所盛放(fàng)的(dí)反(fǎn)應(yīng)液內部, 搖(yáo)晃多次(cì)使得樣本(běn)和(hé)試劑能夠達成(chéng)充分混(hùn)合的狀態。以液體作為存(cún)在形態的(dí)樣(yàng)品, 像(xiàng)食品原(yuán)液，生(shēng)產(chǎn)用(yòng)水(shuǐ)這類(lèi), 要(yào)采(cǎi)集(jí)適量(liáng)該樣(yàng)品, 比如100μL, 直(zhí)接滴加(jiā)到拭子套管內部的反(fǎn)應液裏。

儀器準(zhǔn)備與設置

開(kāi)啟(qǐ)萊(lái)恩德LD - ATP或者LD - ATP +的電(diàn)源, 儀器(qì)進(jìn)而(ér)會自(zì)動(dòng)步入自檢(jiǎn)程序(xù), 這個過(guò)程大概持續30秒, 等(děng)自(zì)檢(jiǎn)順利通過之後, 便會(huì)進(jìn)入主(zhǔ)界麵(miàn), 用(yòng)戶(hù)能(néng)夠按照(zhào)實驗的(dí)需求(qiú), 借助(zhù)觸摸屏去(qù)設(shè)定(dìng)合格(gé)以(yǐ)及不合格的RLU上限(xiàn)值還(huán)有下限值(zhí), 比如(rú)說(shuō), 依照《餐飲(yǐn)服務(wù)食品安全(quán)操作(zuò)規範》裏(lǐ)對於清潔(jié)度的要求, 可以(yǐ)把(bǎ)餐(cān)具表麵的RLU閾(yù)值(zhí)設(shè)定成100 RLU。儀器(qì)具(jù)備RLU檢測(cè)模(mó)式(shì), 儀(yí)器(qì)具備大腸(cháng)菌(jūn)群篩查檢測模(mó)式(shì), 用戶(hù)能(néng)夠按(àn)照實(shí)際情形去(qù)選擇, LD-ATP+型能夠(gòu)借(jiè)助安卓係統來設置數(shù)據上(shàng)傳(chuán)的WiFi參(cān)數, LD-ATP+型能(néng)夠(gòu)借(jiè)由(yóu)安卓係統(tǒng)設(shè)置數據上傳(chuán)的(dí)藍牙(yá)參(cān)數。

實驗(yàn)操作步驟(zhòu)

把經過了(liǎo)前(qián)期處理的拭(shì)子套(tào)管(guǎn), 插入到(dào)儀(yí)器(qì)的(dí)檢測槽之(zhī)內(nèi), 然後(hòu)合上(shàng)蓋子(zǐ), 接著(zhuó)點(diǎn)擊觸摸屏(píng)之上(shàng)的“檢測”按鈕(niǔ), 隨(suí)後儀(yí)器就會(huì)自行(háng)運行, 並且(qiě)開(kāi)始讀(dú)取光(guāng)信號 , 檢測所需要(yào)的(dí)時(shí)長大概是15秒(miǎo) , 檢(jiǎn)測結(jié)束(shù)以(yǐ)後 , 屏(píng)幕將(jiāng)直接顯示出RLU , 也(yě)就(jiù)是相對(duì)光單(dān)位(wèi)的數值(zhí) , 並且會(huì)依(yī)據預(yù)先(xiān)設定好的閾值 , 自(zì)動判斷結果是“合(hé)格”或(huò)者(zhě)“不(bù)合(hé)格” , 儀(yí)器能夠支持(chí)對同一批(pī)次(cì)的多(duō)個(gè)樣本(běn)進行(háng)連續檢測。

數(shù)據采(cǎi)集(jí)與(yǔ)處理(lǐ)

儀器內存(cún)會自(zì)動保(bǎo)存(cún)檢(jiǎn)測結果。LD - ATP型可借由(yóu)miniUSB綫連接電腦(nǎo), 借(jiè)助自(zì)帶(dài)的PC數據(jù)分析軟件來(lái)導(dǎo)出數據(jù)以(yǐ)及生成報告。LD - ATP +型能支持(chí)經WiFi或(huò)者藍(lán)牙把(bǎ)數據(jù)實時上(shàng)傳(chuán)給到萊(lái)恩德提(tí)供的(dí)在(zài)綫監(jiān)管平(píng)台, 該平台能(néng)夠(gòu)自(zì)動(dòng)生成歷(lì)史(shǐ)數(shù)據曲綫圖，餅(bǐng)狀圖(tú)等統計(jì)分(fēn)析(xī)圖表, 並(bìng)且支(zhī)持(chí)以(yǐ)Excel格式(shì)瞬(shùn)時點對點(diǎn)傳輸至(zhì)手(shǒu)機(jī)端(duān), 便(biàn)於管理人(rén)員隨(suí)時隨(suí)地把(bǎ)控衛生狀況(kuàng)。與(yǔ)此同時(shí), 儀(yí)器擁(yōng)有一(yī)種(zhǒng)可以自(zì)動統(tǒng)計合(hé)格(gé)率的功(gōng)能, 這(zhè)種(zhǒng)功能(néng)是(shì)能夠直(zhí)觀(guān)地(dì)反映出整(zhěng)體衛生(shēng)水平的(dí)。

【四(sì)，實(shí)驗結論(lùn)與方案(àn)優(yōu)勢】

基(jī)於(yú)萊(lái)恩(ēn)德ATP熒光(guāng)檢測儀, 本實驗方(fāng)案構(gòu)建(jiàn)了一套(tào)完整快速檢(jiǎn)測流程(chéng), 此(cǐ)流程(chéng)涵蓋從(cóng)現(xiàn)場(cháng)采樣到數據(jù)分析。實(shí)驗(yàn)證實(shí), 該(gāi)方案能夠在(zài)十(shí)幾(jī)秒(miǎo)內完成單個(gè)樣(yàng)本(běn)菌(jūn)落(là)總數相關(guān)指(zhǐ)標評(píng)估, 其(qí)檢(jiǎn)測精度(dù)可達1×10⁻¹⁸ mol, 回收(shōu)率(shuài)穩(wěn)定處於(yú)90 - 110%範圍內(nèi), 相(xiāng)較(jiào)於(yú)傳統(tǒng)培(péi)養法(fǎ), 檢測(cè)時間縮短幅度(dù)超過99%。

在方案(àn)裏, 萊恩(ēn)德ATP熒(yíng)光檢測(cè)儀能夠擁(yōng)有(yǒu)諸般(bān)核心優勢(shì), 其(qí)一(yī)為, 它(tā)的數(shù)據(jù)穩(wěn)定(dìng)性(xìng)良好(hǎo), 其二是(shì), 其檢測(cè)幹擾被(bèi)控(kòng)製在(zài)正負(fù)百分(fēn)之五以內, 如此(cǐ)這(zhè)般(bān), 便可確保結(jié)果可靠, 而且(qiě)具(jù)有很高(gāo)的操(cāo)作(zuò)便捷性(xìng), 無(wú)需專業(yè)的實(shí)驗人員, 隻(zhī)要(yào)經過(guò)簡單(dān)培(péi)訓(xùn), 就能上手(shǒu)施(shī)行(háng)操作, 再者(zhě), 它的智能化程(chéng)度非常高(gāo), 其(qí)中 LD - ATP +型能夠支持數據(jù)無綫(xiàn)上(shàng)傳以及(jí)平台化(huà)管理, 極大地削減了用(yòng)戶的(dí)數據(jù)整(zhěng)理以(yǐ)及追(zhuī)溯成本(běn)。該(gāi)方(fāng)案具(jù)備(bèi)實際(jì)價(jià)值(zhí), 其(qí)價值體現於(yú), 助力食品生產(chǎn)企業, 讓(ràng)餐(cān)飲單(dān)位以及監管機(jī)構得以提(tí)升衛(wèi)生監控效(xiào)率, 達(dá)成(chéng)從“事後檢(jiǎn)測”至(zhì)“現場即時(shí)預(yù)警(jǐng)”的(dí)轉(zhuǎn)變(biàn), 借(jiè)助(zhù)快速(sù)找出清潔死角以及(jí)潛在汙染(rǎn)源(yuán), 來指導準確消(xiāo)毒(dú), 進而降低微生物(wù)風險(xiǎn), 保(bǎo)證(zhèng)符合(hé)GB 14934與GB 4789係(xì)列(liè)標準要(yào)求, 以(yǐ)此達成有效(xiào)保(bǎo)障食(shí)品(pǐn)安(ān)全(quán)的目的(dí)。

【五，參考(kǎo)文(wén)獻/相關(guān)標準(zhǔn)】

1. 國(guó)家安全食品標準, 用(yòng)於(yú)消(xiāo)毒餐（飲）具的(dí), 是(shì)GB 14934 - 2016這個標(biāo)準(zhǔn)。

2. 《食品安全(quán)國家(jiā)標(biāo)準》, 關於《食(shí)品微生物(wù)學檢驗(yàn)》方麵, 當中的《菌(jūn)落(là)總數(shù)測(cè)定》, 遵(zūn)循的(dí)是GB 4789.2 - 2022這(zhè)部標準(zhǔn)。

3. 在中國(guó)國家標(biāo)準中被(bèi)稱為 GB/T 18204.4 - 2013 的, 是關(guān)於公共場所(suǒ)衛(wèi)生(shēng)檢(jiǎn)驗的方(fāng)法, 具(jù)體(tǐ)為該(gāi)標準(zhǔn)的第4部(bù)分(fēn), 此(cǐ)部分專(zhuān)門(mén)針對公共(gòng)用品用(yòng)具微生(shēng)物。

4. 國(guó)家食(shí)品(pǐn)藥(yào)品監(jiān)督管(guǎn)理總局(jú)《餐飲(yǐn)服務(wù)食品安全操作規範》

5. 國際標準(zhǔn)化(huà)組織18593:2018標(biāo)準(zhǔn), 其主(zhǔ)題為(wéi)食品和(hé)動(dòng)物飼料的(dí)微生(shēng)物(wù)學, 包(bāo)含(hán)著(zhuó)表(biǎo)麵采樣技術(shù)這(zhè)一具體內(nèi)容。